在許多腫瘤中，RAS和p53蛋白是最常見的兩個發(fā)生突變的蛋白。

p53是一種腫瘤抑制因子，可以幫助健康細(xì)胞修復(fù)損傷DNA，或在損傷無法修復(fù)的情況下促進(jìn)細(xì)胞凋亡。腫瘤在p53發(fā)生突變，功能關(guān)閉后，會不受控制地生長，而且使用藥物來重新激活已失活的p53十分困難。

RAS（包括KRAS，NRAS和HRAS）是癌癥驅(qū)動基因，RAS突變蛋白會向細(xì)胞發(fā)出信號，使細(xì)胞的生長失去控制。由于RAS蛋白表面光滑，缺乏明顯的結(jié)合位點，一直難以用抑制劑進(jìn)行靶向。

此外，靶向RAS和p53還有一個共同的難點：這兩種蛋白都在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，傳統(tǒng)的抗體需要靶向細(xì)胞表面的抗原靶點，不易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部發(fā)揮作用。

3月1日，Science、Science Immunology和Science Translational Medicine分別發(fā)表了1項最新研究結(jié)果，介紹了美國約翰霍普金斯大學(xué)Bert Vogelstein教授團(tuán)隊開發(fā)的一種新型雙特異性抗體療法。研究人員利用這種雙特異性抗體成功靶向了p53和RAS，在體外和動物腫瘤模型中進(jìn)行的測試也證明了這種療法抑制腫瘤生長的潛力。

來源：Science、Science Immunology和Science Translational Medicine

Bert Vogelstein教授是癌癥基因組學(xué)領(lǐng)域的先驅(qū)。1989年，他的團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)p53基因是癌癥中最常見的突變基因，而且揭示了癌癥是由特定的癌基因和抑癌基因的基因改變逐漸累積所導(dǎo)致的。

Bert Vogelstein教授（來源：約翰霍普金斯大學(xué)醫(yī)學(xué)院）

在研究過程中，研究人員注意到，RAS和p53突變蛋白雖位于胞內(nèi)，但會在細(xì)胞內(nèi)水解產(chǎn)生肽，這些肽段可在與人類白細(xì)胞抗原（HLA）蛋白形成復(fù)合物（pHLA）后被呈遞在細(xì)胞表面，這種肽也被稱為突變相關(guān)新抗原（mutation-associated neoantigens，MANAs）。

為了利用這種真正的腫瘤特異性細(xì)胞表面抗原，他們開發(fā)了一種TCR–m（TCR-mimic）抗體。與TCR相比，TCRm抗體具有更高的親和力，并且容易轉(zhuǎn)換為全長抗體、抗體藥物偶聯(lián)物和雙特異性抗體等形式。

研究人員測試了一個抗體片段庫，篩選了選擇性靶向突變pHLA復(fù)合物的TCRm單鏈可變片段（scFvs），利用這些片段設(shè)計了不同的雙特異性抗體，并最終選擇了下圖這種單鏈雙抗的形式（scDb），其中表現(xiàn)最優(yōu)的H2-scDb即使在非常高的濃度下也不會與正常細(xì)胞的pHLA復(fù)合物結(jié)合，且能有效誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫應(yīng)答。

來源：參考資料[1]

第1項研究中，在腫瘤細(xì)胞攜帶有p53基因特異性突變的小鼠模型中，H2-scDb顯著抑制了腫瘤的生長。

來源：參考資料[1]

第2項研究中，兩種RAS雙抗V2-U scDb和L2-U scDb能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞活化，特異性識別并殺死表達(dá)內(nèi)源性水平RAS突變蛋白的癌細(xì)胞。

來源：參考資料[2]

第3項研究中，同樣類型的雙特異性抗體在T細(xì)胞癌癥的動物模型中可以選擇性地殺死癌性T細(xì)胞，不會攻擊大部分健康的T細(xì)胞。

總的來說，這種雙特異性抗體對常見突變的pHLA具有高度特異性，并且能夠以極低的抗原密度誘導(dǎo)靶細(xì)胞的殺傷，未來可用于靶向那些此前難以成藥的靶點，實現(xiàn)特異性更高的抗癌治療。

參考資料：

[1] Hsiue H. E. et al. Targeting aneoantigen derived from a common TP53 mutation. Science (2021)

[2] Douglass J. et al. Bispecific antibodies targeting mutant RAS neoantigens. Science Immunology (2021)

[3] Paul S. et al. TCR beta chain-directed bispecific antibodies for the treatment of T-cell cancers. Science Translational Medicine (2021)

[4] New immunotherapy drugs target two evasive cancer-driving proteins（來源：Science）

[5] Mutant Gene-Targeted Immunotherapy Approach Developed（來源：約翰霍普金斯大學(xué)醫(yī)學(xué)院）